A Enterite Necrótica (NE) e o estresse por calor

É indiscutível: o ganho em volume e qualidade no sistema produtivo avícola depende diretamente do equilíbrio gastrointestinal dos animais. A maior parte das perdas econômicas, da redução do bem-estar animal e até mesmo do aumento dos riscos de produtos de origem animal à alimentação humana está, de alguma forma, associada às enterites [1,2].

A Enterite Necrótica (NE) é um exemplo de afecção que tem sido relacionada a perdas econômicas superiores a US$ 2 bilhões anuais [3,4]. Esta doença vem aumentando nos últimos anos em criações avícolas, principalmente em países da União Europeia (UE), fato este provavelmente associado à proibição do uso de antimicrobianos como aditivos zootécnicos melhoradores da conversão alimentar [5].

Neste contexto, o uso de antimicrobianos parece compensar, de certa forma, possíveis falhas de manejo, visto que a proibição do uso dos mesmos como aditivo tem sido associada ao retorno da NE na avicultura europeia [9].

Além das relevantes perdas econômicas associadas à doença, ela constitui também um importante fator de risco à Saúde Pública. De fato, devido ao caráter toxigênico das cepas de clostrídios, as carcaças dos animais acometidos de NE podem ser contaminadas durante o abate das aves, carreando potencial para produzir toxinfecção alimentar, caso sejam consumidas [2].

A NE foi descrita pela primeira vez por Parish em 1961, com o isolamento e caracterização do Clostridium welchii. Posteriormente, esta bactéria foi reclassificada como C. perfringens. Em outro estudo realizado no mesmo ano, o autor reproduziu experimentalmente a doença [14].

O diagnóstico de NE inicia-se com a busca por algum fator predisponente existente no plantel. Embora tenha sido possível determinar alguns fatores predisponentes ao desenvolvimento da NE, sua etiologia complexa e a dificuldade de sua reprodução em condições experimentais têm dificultado a definição do mecanismo responsável por seu início [24].

De forma geral, o desenvolvimento da doença tem sido associado à formulação da ração, à presença de coinfecções com outros patógenos (em especial as coccidias), à retirada dos aditivos antimicrobianos, ou dos coccidiostáticos e a mudanças nas condições ambientais [25,26].

Mostrou-se, na vigência de quadros de casos de NE, que a adição de proteína animal à alimentação piora a gravidade das lesões intestinais; fato oposto foi relatado quando do aumento da proporção de fibras e de carboidratos complexos na dieta [27,32]. A substituição da cevada e do milho por trigo também se mostrou capaz de reduzir as lesões durante o curso de uma enterite necrótica. Mostrou-se, também, que o fornecimento de substratos favoráveis à multiplicação bacteriana aumentou a expressão de genes que traduzem as toxinas bacterianas [26,33].

Sabe-se ser a lesão do epitélio intestinal um dos principais fatores predisponentes ao desenvolvimento da NE na avicultura industrial; o principal agente causal de lesões em nível de campo são as coccidioses como a Eimeria spp. [34,35].

A destruição parcial da mucosa intestinal contribui não apenas para uma maior adesão bacteriana como, também, para um maior extravasamento de proteínas; este maior fornecimento de substrato favorece a multiplicação bacteriana, permitindo uma maior produção destas toxinas bacterianas e, via de consequência, um maior aporte aos seus sítios de ação [36–38].

O desenvolvimento da NE é rápido e grave e os sinais clínicos observados são inespecíficos [39]. Os principais sinais relatados em aves incluem diminuição da movimentação, do consumo de ração, apatia, diarreia e eriçamento das penas [40]. Com exceção da diarreia, os demais sinais são reflexos inespecíficos do comportamento doentio [41].

O exame necroscópico de aves com NE mostra distensão das alças intestinais por gás, com aparecimento de lesões características e mais restritas ao intestino delgado; no entanto, são descritas também lesões com menor frequência no ceco, no fígado e em outros órgãos [42]. A mucosa intestinal apresenta-se com coloração enegrecida a arroxeada.

Segundo Helmboldt e Bryant [18] a distribuição e a intensidade das lesões variam com a gravidade da doença. A friabilidade do tecido intestinal e o dano às vilosidades culminam com a formação de uma pseudomembrana de coloração verde amarelada, denominada de “toalha turca” ou “toalha felpuda” [43,44]. Em casos mais graves, ocorre fibronecrose intestinal difusa [45].

O destacamento da serosa, a alteração na espessura da parede intestinal, a presença de conteúdo descamativo e a irregularidade no contorno da mucosa são outros achados macroscópicos encontrados na NE. Nos casos subclínicos, os achados são focais, com formação de regiões de coloração acinzentada a enegrecida ou, às vezes, discretamente avermelhadas [28].

Como o próprio nome da doença sugere, a principal característica da NE é o desenvolvimento de necrose multifocal a coalescente da mucosa; próximo à região de necrose ocorre a formação de um tecido fibrinoso em associação com o debri resultante do processo infeccioso [16,18,21].

O processo de necrose de coagulação ocorre preferencialmente no topo dos vilos, extendendo-se da superfície do epitélio à lâmina própria. Junto das lesões é possível encontrar uma quantidade abundante de bacilos pleomórficos Gram positivos aderidos à superfície das regiões lesionadas, devido à capacidade de adesão que eles têm às moléculas da matriz extracelular [46].

O processo inflamatório é caracterizado pela migração massiva de heterófilos para as regiões em que ocorre a necrose e intenso infiltrado linfoplasmocitário na lâmina basal, fatos acompanhados por edema, hiperemia, congestão e hemorragia da lâmina própria, submucosa e serosa.

O processo de regeneração tecidual produz, de modo geral, fusão e atrofia das vilosidades, com diminuição das células de Globet e perda acentuada dos microvilos [16,34].

A maior parte dos modelos experimentais de enterite necrótica aviária utiliza uma combinação de infecção bacteriana com infecção parasitária (coccídeas). Cooper e Songer [47] propuseram um modelo experimental de infecção por C. perfringens que não utiliza a coinfecção; este modelo propõe o fornecimento da cepa patogênica de C. perfringens em meio de cultura caldo tioglicolato misturado à ração dos animais. No entanto, há que lembrar que o potencial inflamatório do tioglicolato empregado neste modelo pode interferir com os resultados do estudo [48,49].

Mais especificamente, procuramos analisar, as principais variáveis envolvidas com os efeitos do estresse por calor sobre o desenvolvimento da NE. A proposta inicial visou identificar se o estresse por calor era um dos fatores predisponentes ao desenvolvimento da NE. Uma vez estabelecida qual relação teria com o processo infeccioso, foi buscado quais fatores do sistema imune e nervoso estavam sendo influenciados durante o processo infeccioso para definir medidas racionais de manejo para a prevenção da NE.

Desta forma, a tese discute a neuroimunomodulação em aves estressadas por calor e submetidas a diversos desafios infecciosos como o Clostridium perfrintens e Eimeria spp. O trabalho demonstra que existe uma relação entre o Sistema Nervoso Central, o Sistema e Imune e a Microbiota, que culmina com a modulação da resposta do organismo aos processos infecciosos (Figura 1).

Os procedimentos experimentais testaram os efeitos do calor contínuo e intermitente sobre a infecção do C. perfringens, com e sem o estresse por calor e diferentes fatores predisponentes, como a farinha de peixe, co-infecção com Eimeria spp. e substância química irritante intestinal.

Por meio dos estudos foi possível identificar que o estresse por calor associado ou não a inflamação intestinal de origem infecciosa (C. perfringens e da Eimeria spp.) ou química (caldo tioglicolato) ativa o SNC via mecanismos neuroimunes que envolvem a atividade do eixo cérebro-intestino-microbiota (Figura 1), direciona as citocinas (proteínas liberadas pelo sistema imune) para um padrão Th2 e, em decorrência, modula os sinais clínicos da NE e/ou da coccidiose por interferir com a patogênese do C. perfringens e da Eimeria spp.

Podemos comprovar que a resposta do sistema imune para as citocinas (tipo Th1 e Th2) não se faz de forma linear, mas se dá de diferentes intensidades conforme o órgão analisado (Figura 2).

Além disso, ressaltamos que as análises experimentais retiram fotografias pontuais do animal, não abrangendo o animal como um todo. A análise de um órgão ao final de um experimento mostra um pequeno fragmento do animal em um período específico, o que não representa fielmente o animal como um todo, no entanto, a coleta do maior número de informações pode enriquecer o entendimento dos processos.