Enfermedad de Newcastle: Conociendo mejor al virus para tomar las mejores decisiones en el control. Parte II

Por otro lado, aun cuando se conoce que las aves silvestres generalmente albergan cepas de tipo lentogénico, mientras que los brotes en aves domésticas son causados por cepas meso o velogénicas (Sahoo et al., 2022), los registros históricos y de análisis filogenéticos de secuencias disponibles en el banco de genes también sugieren que:

• Los virus virulentos que actualmente circulan podrían haber emergido de virus de baja virulencia de los años 1920-1940, por cambios mutacionales en el sitio de clivaje de la proteína de fusión (Afonso CL, 2021).

Si bien, múltiples estudios han atribuido a las aves silvestres la responsabilidad de brotes, considerándolas reservorios naturales del virus, el análisis de la casuística del Laboratorio de Patología Aviar (LPA) de la Facultad de Medicina Veterinaria de la UNMSM, y estudios recientes realizados con los aislados obtenidos durante cerca de 20 años, han mostrado que:

• Las aves de riña largamente superan la presentación de brotes de la enfermedad de Newcastle en el tiempo, mostrando que portan la mayor diversidad de genotipos, detectándose en ellas solo virus virulentos de los genotipos XII y VII.
• Por lo que en el Perú, constituyen la principal fuente de contaminación y reservorio del virus. 

La vía de transmisión del virus es horizontal, las aves se infectan por inhalación o ingestión de aerosoles o material contaminado; 

• Las aves infectadas eliminan el virus en las secreciones nasales y oculares, de otro lado, además que el virus de la enfermedad de Newcastle replica en el tracto respiratorio, igualmente replica en el intestino, siendo transmitido a través de las heces (Alexander, 1998). 

Figura 3. Transmisión horizontal del virus.

El periodo de incubación varía de 2 a 15 días, con un promedio de 5 a 6 días. 

• Las cepas lentogénicas ocasionan leve infección respiratoria (reacción post vacunal); 
• Las cepas velogénicas viscerotrópicas que son las que principalmente circulan en el mundo, ocasionan severa depresión, edema alrededor de los ojos, hinchazón de la cabeza y diarrea verdosa (Figura 4 y 5). 

Figura 4 y 5: Signos neurológicos, edema facial y diarrea verde, en aves no vacunadas

Los signos neurológicos incluyen torticolis, opistotónos, parálisis de patas y alas; 

En aves en producción, disminución o cesación de la postura y alteraciones en la calidad externa e interna de los huevos, sea decolorados a blancos, en fárfara o cáscara débil (Miller y Koch, 2020; Koffi X et al, 2021) esto último incluso en aves con múltiples vacunas (Figura 8 y 9). 

Figuras 8 y 9. Presencia de huevos decolorados, blancos o en fárfara en ponedoras vacunadas.

Las aves sin protección inmune infectadas con cepas virulentas;

• Muestran severa depresión a partir del segundo día post infección, pudiendo alcanzar 100% de mortalidad al tercer o cuarto día post infección (Figura 6 y 7).

Figura 6 y 7. Signos neurológicos, edema facial y diarrea verde, en aves no vacunadas.

Lesiones macroscópicas

Los vvVEN ocasionan lesiones hemorrágicas en los agregados linfoides del tracto gastrointestinal: mucosa del párpado, tonsilas cecales, placas de peyer, proventrículo y bursa de fabricio (Figuras 9, 10 y 11). 

Figuras 9, 10 y 11. Lesiones hemorrágicas en agregados linfoides de tracto gastrointestinal.

En aves adultas en producción puede observarse peritonitis por huevo atrofia de folículos ováricos y degeneración del oviducto; 

• En aves bien protegidas con muchas vacunas no hay mortalidad y las lesiones pueden pasar desapercibidas (Miller y Koch, 2020; Koffi X et al, 2021 ) .  

Las herramientas de diagnóstico principales incluyen: 

• El aislamiento viral, las pruebas serológicas (hemaglutinación e inhibición de la hemaglutinación, ELISA). 

• Las pruebas moleculares: PCR convencional, PCR en tiempo real y secuenciación del gen F o del genoma completo. 

Comparando los métodos de diagnóstico de la ENC:

El aislamiento viral es la estrategia estándar considerada como la prueba “Gold standard” para el diagnóstico del virus, siendo usado universalmente desde los inicios de 1960 (Alexander DJ. 2003).

• Se realiza a través de la inoculación de huevos embrionados libres de patógenos específicos “Specific Pathogens Free” (SPF), sin embargo, la vía de inoculación saco alantoideo, permite que el virus también pueda ser aislado en huevos embrionados comerciales no SPF.

Es necesario el diagnóstico rápido para implementar medidas de control inmediatas, una prueba de RT-PCR utilizando primers altamente conservados como son los genes de las proteínas M y L, puede detectar todos los genotipos virales permitiendo tener resultados inmediatos (Hoffmann B et al. 2009). 

• Para identificar la virulencia se requieren secuencias que incluyan el sitio de clivaje del gen que codifica la proteína de Fusión. 
• Para identificar el genotipo se requiere secuenciar el gen F completo, que a la vez nos aporta la identificación de virulencia; 

Esto significa que el análisis genómico que no debe faltar cuando se tienen aislados positivos es el análisis del gen completo de fusión. 

El secuenciamiento y el análisis filogenético se han convertido en el método de elección para caracterizar las cepas circulantes en el campo, mostrando una diversidad genética y una constante emergencia de nuevos genotipos en el mundo (Dimitrov et al., 2019). 

El principal objetivo es impedir la introducción del virus a la granja, para evitar la exposición de las aves al virus patógeno.

La mayoría de veces no es posible el aislamiento, por ello, deben ser implementados estrictos protocolos de bioseguridad que incluyan: 

• Control de personas,vehículos, plagas de roedores/moscas y residuos, a todos los niveles del proceso productivo. Estas medidas también deben ser aplicadas a las crianzas de aves de traspatio. 

El hombre y los vehículos son los principales portadores del virus al interior de la granja, por ello son imprescindibles los protocolos de limpieza y desinfección, concientización del personal, y facilitando la vestimenta y materiales exclusivos necesarios para que se cumplan las medidas básicas de bioseguridad como son: el baño, cambio de ropa, zapatos etc. 

Por otro lado, la infraestructura de la granja debe contemplar la protección del galpón, equipo, agua y alimento para evitar el acceso de aves silvestres, principalmente columbiformes que podrían ser portadoras del virus tipo paloma.

La vacunación es la segunda herramienta más importante de prevención, no evita la infección, sino que tiene tres principales objetivos: 

• Disminuir o evitar el impacto patológico de la enfermedad.
• Disminuir la eliminación viral,
• Incrementar la dosis necesaria para causar infección (Dimitrov KM et al, 2017).

Al disminuir la eliminación viral, se controla la diseminación del virus en los lotes infectados (Miller y Koch, 2020). 

En Perú y en muchos países de Latinoamérica donde la enfermedad es endémica, existen reglamentos de control y prevención de la enfermedad, que obligan a la vacunación de todas las aves domésticas de crianza industrial y de traspatio, principalmente pollos y pavos (SENASA, 2003; OIRSA, 2015; ICA, 2012). 

Vacunas a virus vivo y/o inactivado

Las vacunas a virus vivo y/o inactivado se han usado durante muchas décadas para el control de la enfermedad de Newcastle, las vacunas más usadas son las vacunas vivas preparadas con cepas de baja virulencia como la cepa B1, La sota, C2 o las de tropismo entérico como son la VG/GA y PhLMV-42 entre otras. 

• La cepa La sota y su versión clonada como vacunas vivas han demostrado inducir la mejor protección frente al desafío con vvENC, pero uno de los problemas que enfrenta cuando se utiliza en pollos de engorde es su reactividad y la de reducir el rendimiento productivo.  

Rocha et al., 2022, compararon la reacción post vacunal ocasionada por la cepa La sota y una de tropismo intestinal, demostrando que a los 14 y 21 días post vacunación la cepa La sota ocasionó severas lesiones histopatológicas que incluyeron un infiltrado inflamatorio multifocal y moderada deciliación traqueal en comparación a la cepa intestinal que no ocasionó tales lesiones. 

• Esto demuestra que la reacción post vacunal inducida por las vacunas contra la enfermedad de Newcastle es de variable severidad, algunas cepas como las de tropismo entérico y la Hitchner B1, suelen causar una reacción post vacunal leve.
• Mientras que la cepa La Sota puede ocasionar reacciones post vacunales severas, por lo que, aunque esta última induce una rápida y eficiente inmunidad local y humoral, no se recomienda aplicarla como primo vacunación, sino como una vacuna de refuerzo (Alexander et al., 2003).

Vacunas vectorizadas

Una buena opción actual, es el uso de vacunas vectorizadas contra la enfermedad de Newcastle que son aplicadas al primer día de edad, estas tienen insertado el gen de fusión en un vector viral como es el virus Herpes de Pavo (HVT).

• Tienen la ventaja de no causar reacción post vacunal a la vez de inducir mejor y más duradera protección vacunal. 

-En un estudio en pollos de engorde desafiados con una cepa vvVEN del genotipo XII, se obtuvo menor mortalidad (2%) con una vacuna vectorizada HVT/ND que con dos vacunas vivas conteniendo cepas entéricas (12,5% y 18%), así como una menor frecuencia de signos clínicos (p<0.05). 

• Estos resultados también sugieren que el uso de vacunas entéricas en zonas de alto riesgo no es suficiente para inducir una buena protección frente al desafío con cepas virulentas (Sialer M y col. 2020). 

Una desventaja del vector HVT, es su incompatibilidad de uso con otras vacunas HVT, esto crea un problema principalmente para aves ponedoras comerciales que requieren ser vacunadas al primer día de edad contra otros agentes, como Laringotraqueitis (HVT-LT) o Influenza aviar (HVT-IA). 

• Por ello, actualmente existen comercialmente disponibles, vacunas con doble inserto que están diseñadas para proteger simultáneamente a las aves, contra tres enfermedades a la vez: Enfermedad de Marek, ENC y Laringotraqueitis o ENC y enfermedad de Gumboro.

Otro aspecto relacionado con la inmunoprotección, es que aun cuando las cepas del VENC han sido clasificadas en genotipos, estas pertenecen a un solo serotipo. Por esto, las cepas lentogénicas del genotipo II, son ampliamente usadas como vacunas.

Muchos estudios han demostrado la protección de la vacuna con cepa La Sota, controlando la mortalidad y signos clínicos causados por las cepas virulenta;

• Sin embargo, se ha reportado que las vacunas preparadas en base a genotipos homólogos al virus que circula en campo, reducen significativamente la excreción viral en comparación con las vacunas tradicionales del genotipo II (heterólogas).

Lo cual, contribuye a un mejor control de brotes de la enfermedad de Newcastle al reducir la diseminación horizontal del virus que eliminan las aves infectadas (Miller PJ et al, 2007). 

En un estudio, se comparó la protección en pollos de engorde, de una vacuna con una cepa homóloga genoptipo XII, viva e inactivada, desarrollada por genética reversa, y una vacuna con cepa La sota, viva e inactivada. 

• Los programas de vacunación usando las vacunas del genotipo XII (homólogas) redujeron la eliminación viral cloacal a los 5 y 9 dpi. 
• Mientras que los grupos vacunados con cepa La sota (heteróloga), redujeron la eliminación cloacal a los 5 dpi, pero no a los 9 dpi con un vvENC genotipo XII. 

Estos resultados confirman una vez más, que las vacunas con cepas homólogas controlan mejor la eliminación viral al medio ambiente (Cribillero CH Nelly G. 2019).

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