Imunopatologia da Bolsa de Fabricius com ênfase na Doença de Gumboro

Os órgãos primários, como a bursa de Fabricius e o timo ( células B e T, respectivamente), atrofiam com respectivamente 16 -e 17 ou mais semanas, e o tecido linfóide secundário, se encarrega de toda a reação imune.

O intestino é o maior tecido linfóide com milhares de conglomerados intra epiteliais e centenas de placas de Peyer (entre 200 a 300), além das tonsilas cecais.

A IMUNOPATOLOGIA

A saúde das aves depende desses parênquimas. Alguns agentes possuem tropismo por eles, como o birnavírus, que afeta células B imaturas e em divisão, e o gyrovírus que afeta as células T, causando a anemia infecciosa aviária. Outros, como o vírus causador da doença de Newcastle, e algumas bactérias e toxinas, lesionam o tecido.

Na DG aguda, em animais entre 2 a 6 semanas, há inflamação “bursal” e severa depleção linfóide (necrose). A mortalidade varia de 20 a 30%, e macroscopicamente ocorre edema do órgão, e com a continuidade, depleção e atrofia.

O edema eleva seu peso a 6 g; perdura por 3 dias, com atrofia após 3-5 dias. Interessantemente há produção de anticorpos, a partir de células B maturas, multilocadas. Essas células resistem mais ao vírus que as imaturas.

O título da a.c, chega a 1: 1000. Essa patologia ocorre após declínio dos anticorpos passivos. A histopatologia mostra depleção a partir da medular dos folículos, com necrose linfóide e edema inflamatório, além de característica infiltração heterofílica.

Posteriormente os folículos retraem, com hipoplasia e atrofia, além de fibroplastia interfolicular,acompanhado de infiltração macrofágica nas regiões centrais. Ocorre formação pseudocística. A lesão regenera desde que se mantenha íntegra a membrana basal, a qual é revestida por células dendriticas ativantes de genes responsáveis pela clonagem de células B.

Esse fenômeno foi bem caracterizado por Ivan; J ( 2001) usando como marcador, o carboidrato de Lewis, que indica a conversão gênica. Isso relativiza bastante a bursometria e sua interpretação.

A forma clássica de DG, vem sendo substituída por aquelas devidas às variantes virais ( vvIBDV). Nessas, se observa uma rápida imunodepressão, com elevados índices de mortalidade, ocorrendo mais precocemente, e rompendo as defesas passivas com facilidade. A característica lesão bursal aguda e a fase clinica, podem não ser percebidas. As variantes dependem da região, e a patotipagem varia.

Essas variantes levaram às novas vacinas, programas e monitoramentos. Cepas suaves, intermediárias, intermediárias plus e quentes, estão ligadas ao nome do pesquisador que a descreveu, como Lukert, Winterfield etc, ou indicações alfanuméricas como D78, V 877 etc. Essas denominações, são confusas, e já foi proposto um novo sistema para designar esses isolados ( Jackwood, DJ; 2018)

Imagem 1. Cinética da infecção (PI) Abdul R ( 2011)

Após 5 h PI: Viremia primária e chegada à bolsa, seguido por viremia secundária em conglomerados linfóides em outros órgãos. Na bursa de Fabricius e no baço é onde o vírus atinge sua concentração máxima.

De acordo com Abdul R ( 2011); o vírus permanece na bursa de Fabricius por 21 dias, sendo baixíssima a concentração em outros tecidos.

O vírus permanece na “cama” dos frangos e na poeira por 60 e 28 dias respectivamente, requerendo a investigação da sobrevivência das cepas vacinais, importante no controle epidemiológico.

Resumindo, o birnavírus afeta células B com receptor IgM em fase de divisão. Já as células T são totalmente refratárias e importantes na inflamação e controle viral. Assim, como resultado da divisão viral nessas últimas, há inflamação, necrose/apoptose e depleção.

Essa lesão é também produto de cepas vacinais, como as intermediárias plus por exemplo. As lesões refletem o “take” da vacina, que guarda relação com os anticorpos passivos. O anticorpo ativo se produz nos núcleos germinativos.

ENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS NA RESPOSTA IMUNE/INFLAMATÓRIA E ADAPTATIVA

Macrófagos e APCs (células apresentadoras de antígenos) : Fagocitose e reconhecimento antigênico. Contatam o agente infeccioso ou vacinal. A partir delas sobrevém uma cascata de informações. Para tal, por influência dos genes inflamatórios, reguladores e outros, liberam citoquinas como a IL1 (alvo células Th 2 e células B) , IL8 (alvo células T e neutrófilos), a IL12 que tem como alvo os linfócitos TH1 e células NK (“neutral killers”), a IL 18 (alvo, linfócitos TH1), sem contar o TNF ( fator de necrose tumoral).

Linfócitos T , CD4 e o CD8 , sendo que após a ativação pelos macrófagos e APCs o CD4 acaba se diferenciando em “helpers TH2 . Existem dois ramos da resposta imune, a celular (TH1) e a humoral (TH2). O ideal é que ambas sejam estimuladas. Esses linfócitos T, quando ativados elaboram interleucinas, entre inflamatórias e não inflamatórias.

A rigor o TH1 libera as IL1, IL3, IL15, IL17, com várias células alvo entre macrófagos e outras. Já o TH2 libera as interleucinas, IL3, IL4, IL5, IL9, IL10, IL13, basicamente com os mesmos alvos. A tendência é sempre o equilíbrio entre essas interleucinas e suas funções. Por exemplo, a interleucina não inflamatória, como a IL10, contrabalança os efeitos da IL12, nitidamente inflamatória. Nas avaliações laboratoriais, em geral usando ELISA ou biologia molecular, as IL6, IL18, IL8, IL12, IL1, IFN gama, são essencialmente inflamatórios. As células T ativadas também produzem proteínas líticas, como as perforinas, que participam da necrose das células B infectadas.

Células B, ou são estimuladas pelas células T como vimos acima, ou interagem diretamente com o antígeno, levando a formação de anticorpos, após a ativação dos linfócitos T nos núcleos germinativos, como os do baço, principalmente. Produzem, evidentemente uma maior concentração de interleucinas não inflamatória, com as IL10 e IL14.

Por outro lado o linfócito T CD8 é toxigênico para células que albergam antígenos, principalmente virais, e as células NK ( neutral killers), um tipo de linfócito, intervém quando os outros mecanismos de “limpeza”falham, e não são capazes de reconhecer células infectadas. Essas células também dependem de interleucinas.

O acima exposto é uma noção do processo de resposta, e a abordagem de todos os mecanismos imune escapam ao objetivo dessa revisão. Tampouco se mencionou a maneira pela qual os macrófagos e células apresentadoras de antígenos contatam com os diversos agentes patogênicos antes de iniciar a cascata “imunidade inata/adquirida”.

Nessas células existem dezenas de receptores capazes de reconhecerem antígenos (TLRs), e no caso do birnavirus, principalmente o TLR 3. Importantes são também alguns receptores de globulinas (FCyR), envolvidos na ligação com os imunocomplexos.

Na bibliografia se incluem algumas referências que podem ser úteis a quem quiser se aprofundar.

A IMUNOPATOLOGIA DAS CEPAS VACINAIS

Os anticorpos maternais protegem por 3 semanas. A IgY se origina do contato entre as aves com o vírus a campo ou vacinal. O pico de anticorpos, na imunidade ativa, se situa entre 3 a 5 semanas.

O vírus vacinal, quando inativo não se multiplica no ambiente. O mesmo para as vacinas vetorizadas.

O vírus atenuado, além de quebrar a barreira dos anticorpos maternais, coloniza a bursa de Fabricius e o ambiente. Quanto maior a atenuação do vírus, menos ele rompe anticorpos passivos e menor é a capacidade de multiplicação. As vacinas de imunocomplexo, (exemplo, a cepa V877), não são convencionais. Nelas há uma combinação entre um volume de vírus atenuado, com o volume exato do anticorpo neutralizante pré elaborado.

Esse conjunto se liga a receptores de globulinas FcRs , mais propriamente o receptor FCy-CHIR-AB1, que está disposto, em grande quantidade em neutrófilo, linfócitos e principalmente macrófagos e células dendriticas foliculares, nos núcleos germinativos, auxiliado pelo complemento C3 presente no soro.

O ICX resiste aos anticorpos maternais. O anticorpo conjugado previne a ação do anticorpo passivo por semanas, o que permite a baixa de título do a.c passivo.

Assim, se protege o antígeno vacinal imunocomplexado ( icossoma). Parte do vírus vacinal liberado, multiplica, e as lesões bursais em função disso.

No entanto, a produção de anticorpos de alta afinidade e clonagem de células T e B diferenciadas ocorrem a partir da interação ICX/células dendriticas foliculares nos núcleos germinativos, como o esplênico, que são anteriores às lesões na bursa de Fabricius.

No entender do autor, as lesões bursais, indicam apenas o “take” da vacina e não guarda relação com a produção de anticorpos.

Imagem 2: Bolsa de aves vacinadas exibindo hipoplasia folicular e retração folicular com aproximadamente 14 dias após vacinação

Imagem 3: Bolsa de aves vacinadas, exibindo total repopulação linfoide Aproximadamente 28 dias após.

Vantagens potenciais advindas do uso dessa tecnologia ( Haddad E.E; 2016):

Proteção acentuada contra os anticorpos passivos.

A imunidade, decorre da estimulação das células B que predominam nas áreas de células dendriticas foliculares nos núcleos germinativos, seguidas pela ativação das mesmas pelas células T . A mutação e clonagem das células B as diferenciam como produtoras de anticorpos de elevada afinidade e pela produção de células de memória.

A multiplicação do vírus vacinal auxilia a mudar o padrão da população viral do galpão.

O tipo de imunoglobulina produzida com uma vacina ICX tende a ter mais afinidade do que o obtido a partir de vírus livre.

O autor chama a atenção quanto à excelência do arsenal vacinal que se dispõem no Brasil, mas também à necessidade de monitoramento efetivo de uso e a perfeita caracterização da sobrevivência das cepas vacinais no ambiente.

BIBLIOGRAFIA

2) Bordin E.L. Diagnóstico histopatológico. Doenças das aves. 2nd Edição. FACTA 2009

3) Cheville N. Studies of the pathogenesis of Gumboro disease in the BF, spleen, thymus of chicken. Veterinary Pathology 1979

4) Haddad E. A message from the immune system: A vaccine technology in needs of exploration. Journal of vaccine and vaccination 2016

5) Ivan J. Functional restoration of BF following “in ovo” infectious vaccine. Veterinary Immunopathology 2001

6) Jackwood DJ. A proposed nomenclature for infectious bursal disease virus isolates. Avian Pathology 2018

7) Rauf A. Persistence, distribution and immunopathogenesis of bursal disease virus in chickens. PhD dissertation thesis. Ohio State University

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