E. coli patogênica para aves: sensibilidade ao MICROFLUD®F

Porém, o uso de antimicrobianos tem levado à seleção de bactérias resistentes (ARIAS; CARRILHO, 2012; SILVA; LINCOPAN, 2012), dificultando o tratamento de doenças como a colibacilose  aviária.

O Florfenicol é um antimicrobiano sintético de amplo espectro, pertencente à classe dos Anfenicóis, que desempenham um papel importante na redução das perdas na indústria avícola resultantes de certas doenças bacterianas, incluindo a colibacilose aviária (SHENG LI et al., 2007).

                                                                                                                                                                                                                      Florfenicol possui uma considerável atividade contra bactérias gram negativas e gram positivas resistentes ao cloranfenicol e ao tiamfenicol.

É um fármaco com menor impacto na saúde humana e animal, sendo mais seguro para o uso que os seus antecessores, devido a substituição do grupo p-nitro ligado ao anel benzênico por um grupo sulfonil-metil (Figura 1), o que anteriormente era responsável por induzir a anemia aplástica e supressão da atividade da medula óssea, condições potencialmente fatais devido a semelhança dos ribossomos mitocondriais dos mamíferos aos bacterianos.

Figura 1: A substituição do grupo p-nitro do anel benzênico do Cloranfenicol por um grupo sulfonil-metil no Florfenicol faz com que este não apresente riscos à saúde.

MECANISMO DE AÇÃO DO FLORFENICOL

O Florfenicol é um antibiótico que interfere na síntese proteica com a subunidade 50S do ribossomo procarioto 70S, ele inibe a formação de ligações peptídicas durante o alongamento da cadeia polipeptídica, sendo um antibiótico de amplo aspecto (MADIGAN e MARTINKO, 2010; FINKEL et al, 2010).

Pode atuar tanto como bactericida ou como bacteriostático (mais utilizado), dependendo do micro-organismo.

OBJETIVO GERAL DO TRABALHO

O objetivo do trabalho, conduzido na Universidade Estadual de Londrina – PR (UEL), foi avaliar a sensibilidade ao Microflud^® F ORAL em amostras de Escherichia coli isoladas de aves com Colibacilose.

MATERIAL E MÉTODOS

Amostras bacterianas:

Foram testadas 19 amostras de E. coli isoladas de aves, sendo:

A amostra E. coli ATCC 25922 foi utilizada como cepa referência para sensibilidade no teste de microdiluição em caldo.

MICRODILUIÇÃO EM CALDO PARA DETECÇÃO
DO MIC PARA MICROFLUD^® F ORAL

Inicialmente, o produto Microflud^® F ORAL foi diluído em água deionizada, para uma concentração final de 1000 μg/mL, em tubos tipo falcon esterilizados.

Foi realizado o teste de microdiluição em caldo para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) de acordo com CLSI (2008).

As bactérias foram cultivadas inicialmente em placas de Ágar Muller-Hinton (MH) a 37°C durante 24h, e posteriormente diluídas caldo MH até obter-se a concentração de 106 células/mL.

Em placas de 96 poços, foram adicionadas suspensões bacterianas previamente diluídas e o meio contendo o produto, em concentrações variando de 512 a 1μg/mL.

Todas as amostras foram testadas também para a concentração de 100 μg/mL, concentração do produto recomendada pelo fabricante.

 A cultura foi então incubada a 37°C por 24h e o crescimento bacteriano avaliado em espectrofotômetro, sob o comprimento de onda de 600 nm.

RESULTADOS E DISCUSSÃO MICRODILUIÇÃO EM CALDO

Os resultados de microdiluição em caldo (Tabela 1) mostraram atividade do Microflud® F ORAL contra 18 amostras (95%) de
Escherichia coli isoladas de aves, na concentração recomendada pelo fabricante (100 μg/ml).

Pelo valor de MIC (Concentração Inibitória Mínima):

17 amostras (90%) foram sensíveis ao Florfenicol, tendo como parâmetro E. coli ATCC 25922, conhecidamente sensível ao florfenicol e com MIC variando de 2-8 μg/ml, segundo CLSI (2008); uma vez que não há parâmetros pré-estabelecidos para interpretação do MIC para E. coli.

Tabela 1: Valores de concentração inibitória mínima (MIC) do produto frente a diferentes cepas bacterianas, com perfil de resistência aos antimicrobianos das mesmas.                                         *CIP (Ciprofloxacina), ENO (Enrofloxacina), GEN (Gentamicina), NAL (Ácido Nalidíxico), NEO (Neomicina), NIT (Nitrofurantoína), SUL (Sulfonamida), SUT (Sulfametoxazol-Trimetropim), TET (Tetraciclina), AMP (Ampicilina), CLO (Cloranfenicol), FLF (Florfenicol), NOR (Norfloxacina), CFZ (Cefazolina), CTX (Cefotaxima), DOX (Doxiciclina). **Interpretação do MIC para florfenicol de acordo com o CLSI (2008), com base nos resultados da E. coli ATCC 25922, sensível ao florfenicol. Sensível: ≤ 8 μg/ml; Resistente: ≥ 16 μg/ml.

FORAM TESTADAS AMOSTRAS SENSÍVEIS E
MULTIRRESISTENTES

As amostras multirresistentes foram selecionadas, uma vez que, por apresentarem resistência a 3 ou mais classes de antimicrobianos, são consideradas multirresistentes (MDR), estas também apresentam maior tendência a resistência a outros antimicrobianos.

As duas amostras que se mostraram resistentes pelo MIC eram consideradas multirresistentes.

Porém, o índice de resistência ao Florfenicol encontrado em nosso trabalho (10%) está abaixo de outros relatos descritos na literatura.

Na China em 2004 a 2005, a frequência de resistência foi de 29% (SHENG LI et al., 2007) ao serem testadas 70 amostras de E. coli.

Estudos de monitoramento da resistência aos antimicrobianos deveriam ser conduzidos a fim de avaliar a dinâmica da disseminação de resistência, sempre que um novo antimicrobiano é inserido em um ambiente, ou sempre que um antimicrobiano é usado a muito tempo em uma região.

Estes estudos permitiriam um melhor planejamento quanto aos antimicrobianos a serem ou não usados em uma propriedade, bem como redução da disseminação da resistência aos antimicrobianos, oferecendo menos risco no tratamento de infecções em animais e humanos.

CONCLUSÃO

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